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Spark酶标仪加速新型抗菌药物的研发进程

文章来源:发布时间:2018-01-15 15:19:09浏览数量:

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应对抗生素耐药性的新型抗菌药物的探索和开发,需要深入了解细菌响应和适应新化合物的方式。为测定潜在药物的效能,需要进行一系列的测试,如聚集和粘附
/侵入检测。在法国贝桑松的生物科技企业SMALTIS内部,测试自动化大幅提高了通量和数据采集速度,让研究人员能够腾出更多时间开发新实验。
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SMALTISSophie GuénardCédric Muller博士于2014年创立,是一家专营微生物学、分子学和细胞生物学服务的CRO(外包研究机构)。其面向各种公私研究实验室,提供定制细菌菌株、评估抗菌化合物活性、分析微生物样本等服务,协助客户完成各种研发项目。公司源于共同的研究背景,正如Cédric所言:“Sophie和我曾在Patrick Plésiat实验室研究微生物学,希望探索囊肿性纤维化的首要致死因素绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)表现出的抗生素耐受性原理。我们有幸与一家大型药企一同开发某种抗体疫苗;通过该项目,我们有了创办一家企业来专门帮助实验室加速微生物学研发的念头。我们可以进行最小抑菌浓度(MIC)研究和杀菌时间曲线实验,鉴定测试化合物和靶标细菌的作用机制,以及细菌适应药物的方式,从而帮助客户提高化合药物效能。”

 

聚集和粘附/侵入检测是SMALTIS提供的众多服务中的一种。为了感染宿主,细菌通过纤毛(发卡状结构)粘附到宿主细胞上,并与特定的细菌细胞受体相互作用。聚集检测实验可通过化合物与造成聚集的纤毛间的相互作用,评估化合物抑制粘附的能力。Cédric称:“我们的基础检测通过拍摄持续五小时的常规图像,检测药物-细菌间的相互作用。最初进行聚集检测时,客户为我们制定了专用于高内涵成像平台的具体操作流程。由于这类系统较为昂贵,我们转而寻求替代方法,开发了手动设置方法:首先在旋转培养箱上孵育平板,然后每小时取下平板进行分析,之后再将平板放入培养箱。这种方法虽然有效,但非常耗费人力。”

 

“之后与Jean-Minjoz医院的一家研究实验室合作时,我们接触到了Spark®多功能酶标仪。我们在该医院的仪器上开发了聚集检测实验方案,Tecan团队的一组成员帮助我们进行了部分验证实验,证明我们的技术和方法可以应用到他们的系统上。之后我们又单独购买了Spark酶标仪,从而以远超高内涵平台的性价比进行同类聚集检测。”

 

Cédric补充道:“我们目前的实验运行无需监控,还可交由Spark绘制实验全程的菌株生长曲线。自动化让我们能够腾出更多时间开发其它实验。

 

“之前需要一个人花费三天时间,现在只需一个半钟头。”

 

“我们还采用Spark进行粘附/侵入检测,测定细菌菌株粘附或侵入真核细胞的能力。首先用细菌菌株接种细胞,进行一系列洗涤后,采用DAPI染色真核细胞,并让含有特定抗体的细菌与AlexaFluor®染料结合。我们分别测定真核细胞和细菌发出的蓝色和绿色荧光,从而判定菌株粘附/侵入能力的比例。在购买Spark之前,必须拍摄四到六张图像以覆盖每个96孔板,然后采用显微镜分析颜色。如今这些工作自动化完成,之前需要一个人花费三天时间,现在只需一个半钟头即可完成。Spark的使用体验非常好;其可以轻松适应各种实验安排,同时其高通量和自动化能力也可帮助我们不断改善为客户提供的服务内容。”Cédric总结道。

 

上述所有Tecan产品仅用于研究用途,不可用于临床诊断。